Снижение бактериальной обсемененности больничных поверхностей (часть 2)

Эксперименты с контролируемым загрязнением (тесты in vitro)

В экспериментах in vitro образцы материалов, используемых в больничных помещениях (керамики, ПВХ, резины, стекловидного фарфора), обрабатывали пробиотическим раствором. Для заражения поверхностей, с которых брали пробы, использовали раствор, содержащий в известной концентрации (30 x 10⁶ клетки/мл, 15 мл/м²) штаммы Escherichiacoli, Pseudomonasaeruginosaи Staphylococcusaureus. Бактериальную обсемененность измеряли путем определения количества колоний на контактных чашках типа RODAC (производитель BD), содержащих триптиказо-соевый агар с лецитином,гистидином и твином‑20, чтобы нейтрализовать действие дезинфицирующих средств. Количество колоний определяли, как общее микробное число или как число колоний определенного вида, используя штамм-специфические среды. Чтобы гарантировать стерильность, использовали контрольные стерильные чашки.

Натурные испытания

Для проведения натурных испытаний в двух разных отделениях Университетской больницы Св. Анны в Ферраре применялась та же процедура санитарной обработки, что и для тестов с контролируемым загрязнением. Испытания проводили в терапевтическом стационаре (GM) и поликлиническом отделении (AU), где поочередно использовали процедуры пробиотической и химической очистки. Отделение GM поделено на две части: зал S и зал T (это оригинальные названия двух помещений, используемые со времени строительства больницы), а AU включает подразделения офтальмологии/кардиологии и ортопедии. Параметры эксперимента, касающиеся процедур очистки, а также поверхностей и участков, с которых осуществляли взятие проб, представлены в табл. 1. Процедуру пробиотической санитарной обработки оценивали в течение четырех месяцев (март–август 2011 года), в рамках трех разных периодов времени. В конце первого месяца протоколы санитарной обработки участка/подразделения каждого отделения меняли на другой. Чтобы убедиться в эффективности и стабильности пробиотического протокола очистки, в конце второго месяца взятия проб срок исследования в помещениях GMбыл продлен еще на два месяца. Причинами такого решения были как результаты испытаний, которые оставались неизменными в течение последнего периода использования PCHS‑протокола, так и тот весьма существенный факт, что к тому времени уже было получено более 11 000 очень дорогостоящих микробиологических проб. Ни процедура очистки (PCHS или CBS), ни используемые продукты за время исследования не менялись. Все продукты относились к одной и той же закупочной партии. По утверждениям производителей, упаковка пробиотического продукта и химического средства не требовала каких-либо специальных мер хранения. В течение первого и второго периодов пробы брали один раз в неделю в 07:00 (момент времени t₁) и в 14:00 (момент времени t₂), через 30 минут и 7 часов после санитарной обработки, соответственно. В течение третьего периода пробы брали два раза в неделю в 14:00 (момент времени t₂) и в 06:00 дня, следующего за санитарной обработкой (момент времени t₃), непосредственно перед проведением ежедневной уборки. Всего было обработано 11 223 микробиологических проб с поверхностей по методологии микробиологического мониторинга окружающей среды (MEM) [22]. Отбор микробиологических проб осуществляли с двух разных участков пола в одном и том же коридоре (в начале и в конце коридора), с одного случайно выбранного места на полу туалета и с поверхности раковины. В общей сложности пробы брали с 33 различных поверхностей. Каждое измерение проводили три раза. 

Таблица 1. Параметры отбора микробиологических проб и условия тестирования в больнице, ставшей экспериментальной площадкой для исследования

^aТерапевтический стационар

^bПоликлиническое отделение

^cПодразделение офтальмологии/кардиологии

^dОртопедическое подразделение

^eСистема гигиены на основе пробиотической очистки

^fХимический хлорсодержащий раствор

^gМониторинг не проводился

Расчет микробной обсемененности

Уменьшение количества патогенов за счет использования PCHS‑протокола оценивали в процентах по сравнению с показателями, полученными при использовании CBS‑протокола. Среднее количество каждого патогена (в КОЕ/100 см²), полученное при использовании CBS‑протокола в периоды 1 и 2 (табл. 1), сравнивали с соответствующими значениями в период 3, полученными при использовании пробиотического продукта. Для первого и второго периодов отбора проб расчет микробной обсемененности осуществляли по следующей формуле:

где

Во всех выражениях использованы следующие обозначения: